「ELISA讲堂」血清派vs血浆派:ELISA界的世纪之争

点击次数:119次     发布时间:2025/7/4 10:35:01

一 血清和血浆的"前世今生"与5大隐藏差异

各位实验er们,今天我们来聊一个你们可能从来没细想过的"灵魂拷问"——做ELISA到底该用血清还是血浆?别以为这只是简单的二选一,选错了你的数据可能从第一步就注定了要翻车!

1. 抗凝剂的"魔法攻击"

常用抗凝剂对ELISA的影响:

 

EDTA:螯合二价阳离子,影响酶活性(你的OD值可能正在偷偷变低)

肝素:干扰抗原抗体结合(某些指标可能"被消失")

枸橼酸盐1:9稀释效应(浓度直接被"打八折")

2. 纤维蛋白原的"潜伏行动"

血浆中的隐形杀手:微凝块堵塞枪头(移液时的手感像在吸珍珠奶茶)

冻存后产生沉淀(解冻后样本里藏着"雪花")

3. 溶血风险的"暗箱操作"

血红蛋白>0.2g/L干扰HRP系统(你的标准曲线可能变成"心电图")

血浆制备多一次离心=多一次溶血风险

4. 蛋白水解酶的"午夜凶铃"

血浆中TNF-α在4℃下6小时降解30%(时间就是数据!)

血清中的蛋白酶抑制剂更稳定

5. 补体系统的"无间道"

血清补体活性高导致非特异结合(背景值高可能不是抗体的问题)

某些检测项目需要刻意保留补体活性

 

二 实验室选择与处理指南

1. 血清使用场景

✔️ 补体相关指标检测
✔️ 需要长期保存的样本
✔️ 凝血系统相关分子

2. 血浆必备场景

✔️ 急诊指标快速检测
✔️ 血小板释放因子
✔️ vWF等特殊项目

 

3. 样本处理黄金法则

血清

室温凝固30-60分钟(急性子同学请忍住)

4℃过夜收率提高10%

2000g离心10分钟(转速不够会得到"草莓果冻")

血浆

采血后30分钟内离心(血小板在偷偷搞事情)

二次离心去除微小凝块(15000g 10分钟)

立即分装速冻(冻融一次=数据偏差15%)

三 来自审稿人的灵魂三问

期刊统计显示:

15.7%的ELISA文章因样本问题被拒

审稿人必问:

1."为什么选这个样本类型?"

2."考虑过抗凝剂影响吗?"

3."不同样本数据可比吗?"

四 实验救星:睿信ELISA解决方案

面对血清/血浆的选择困境,睿信生物ELISA试剂盒给出专业答案:

▌ 双版本设计:

血清专用版:添加补体灭活成分,降低背景干扰

血浆优化版:含抗凝剂中和剂,结果更稳定

 

▌ 四大核心优势:

1.超宽检测范围:抗干扰能力提升50%

2.预包被板CV<3%:孔间差异比头发丝还细

3.即用型试剂:减少3个操作步骤

4.血清/血浆双重验证:提供交叉验证数据

 

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