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科研-小鼠β-乳球蛋白IgE抗体（β-LG IgE）定性检测试剂盒
- 产品名称：
- 科研-小鼠β-乳球蛋白IgE抗体（β-LG IgE）定性检测试剂盒
- 保存温度：
- 2-8℃
- 产品型号：
- RX-AN203347M
- 产品规格：
- 96T/48T
- 产品库存：
- 100
- 产品价格：
- ￥ 电议
| 反应种属 | 小鼠 |
| 检测范围 | 25ng/mL-800ng/mL |
| 物理性能 | 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装，无破损漏气。 |
| 用途 | 用于定性检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠β-乳球蛋白IgE抗体（β-LG IgE）。 |
| 实验原理 | 试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠β-乳球蛋白IgE抗体（β-LG IgE）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、阴性和阳性对照，再加入HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠β-乳球蛋白IgE抗体（β-LG IgE）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），判定阴阳性。 |
| 特异性 | / |
| 重复性 | 板内变异系数小于15%。 |
| 回收率 | / |
| 试验所需自备试验器材 | 1、酶标仪（450nm）2、高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3、37℃恒温箱4、蒸馏水或去离子水 |
| 操作程序 | 1、从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。2、设置阴性对照孔、阳性对照孔和样本孔，阴性、阳性对照孔各加 50μL 对照品，样本孔中加入待测样本 50μL，空白孔不加。3、除空白孔外，对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。4、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。5、每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。6、每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 |
| 注意事项 | 1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。3、消除板底残留的液体和手指印，否则影响 OD 值。4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。6、在储存和温育时避免强光直接照射。7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。8、任何反应试剂不能接触漂白 |
| 问题分析 | ①问题描述：标准曲线差可能原因及相应对策：1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤3.移液不精确——检查和校正移液器②问题描述：精密度低可能原因及相应对策：1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模4.加样不精确——检查和校正移液器③问题描述：O.D值低可能原因及相应对策：1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器，精确加入试剂2.温育时间不正确——保证充足的温育时间3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物，颜色迅速显现来检查5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数④问题描述：样本值可能原因及相应对策：1.不正确的样本储存方式——正确储存样本，使用新鲜样本进行实验2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本，重复实验 |
| 声明 | 该试剂盒仅供研究使用，如将其用于临床诊断或任何其他用途，我公司将不对因此产生的问题负责，亦不承担任何法律责任。 |
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